Espaço: Caracterização - Equipamentos

Microscópios com estrutura vertical são capazes de produzir iluminação fluorescente por vias ópticas episcópicas ou diascópicas, embora a última raramente seja usada hoje. Os epi-iluminadores geralmente consistem em uma lâmpada de mercúrio ou xenônio acoplada a um iluminador vertical que é posicionado acima do quadro principal em uma montagem separada. O porta-objetivas do microscópio e os componentes de luz transmitida (iluminador diascópico, condensador, diafragma de campo, filtros, etc.) são integrados à estrutura principal, enquanto os componentes de fluorescência são alojados no iluminador vertical.

Esses iluminadores geralmente contêm uma torre giratória ou deslizante que abriga de quatro a seis "cubos" que contêm uma mistura de filtros de interferência, incluindo um filtro de barreira, espelho dicróico e um filtro de excitação. Conforme ilustrado abaixo, a luz emitida pela lâmpada posicionada na casa de lâmpada episcópica passa por uma lente coletora e, em seguida, pelos diafragmas de campo e de abertura antes de entrar no primeiro filtro de interferência no conjunto de cubos, o filtro de emissão.

Essa luz é então direcionada através da objetiva e sobre o espécime por um espelho dicróico especial que reflete certos comprimentos de onda enquanto passa por outros. Fluorescência secundária, emitida por fluoróforos que residem na amostra, volta através da objetiva e do espelho dicróico antes de passar por um filtro de barreira e para as oculares do microscópio ou sistema de câmera.

Adicionalmente, este equipamento possui função de "stitching" para formação de imagens maiores.